傳染性喉氣管炎（ILT），簡(jiǎn)稱傳喉，在1925年首次見于報(bào)道，是一種存在已久的家禽呼吸道傳染病。傳喉在中國(guó)一直以來(lái)主要感染蛋雞、種雞和黃羽肉雞。但是近年來(lái)，白羽肉雞發(fā)生傳喉的病例逐年增加，嚴(yán)重影響肉雞生產(chǎn)性能，給養(yǎng)殖利潤(rùn)造成了重大損失。作為農(nóng)場(chǎng)管理者，怎樣知道當(dāng)?shù)厥欠裼袀骱碓诎子鹑怆u群中流行？要不要采取免疫或其它防控措施？首先需要的是準(zhǔn)確診斷。
傳染性喉氣管炎的癥狀包括：咳嗽、濕性啰音、呼吸困難、甩頭、排出血痰、流淚、眼瞼粘連和眶下腫脹（圖1）等。剖檢可見鼻腔和氣管內(nèi)存在大量黏液（圖2），喉頭和氣管內(nèi)存在帶血黏液，紅色或干酪樣的假膜，甚至形成栓子。對(duì)于蛋雞來(lái)說(shuō)，一般可通過(guò)排出血痰和氣管內(nèi)的帶血黏液或紅色栓子來(lái)確診傳喉。但是對(duì)于白羽肉雞，特別是3~4周齡的白羽肉雞，感染傳喉后常常僅表現(xiàn)為呼吸道癥狀和生產(chǎn)性能下降。這時(shí)我們很難把傳喉與支原體、傳支、新城疫以及低致病性禽流感等其它呼吸道疾病區(qū)分開來(lái)。因此通過(guò)實(shí)驗(yàn)室手段來(lái)診斷傳喉是非常必要的。常用的實(shí)驗(yàn)室診斷方法分為病理學(xué)方法、病原學(xué)方法和血清學(xué)方法。
圖1：發(fā)生傳喉后呼吸困難和結(jié)膜粘連的雞（來(lái)源：Vasudevan Gowthaman）
圖2：氣管內(nèi)的帶血黏液和干酪物（來(lái)源：Walter Fuchs）
病理學(xué)方法主要是指包涵體檢測(cè)。其具體方法是采集氣管或眼瞼等病變組織制成切片，在顯微鏡下觀察。傳染性喉氣管炎的特征性病變是在鏡下觀察到合胞體，在合胞體內(nèi)存在核內(nèi)包涵體（圖3）。需要注意的是，做病理切片檢查一般要求送檢活雞，死亡時(shí)間太長(zhǎng)雞會(huì)發(fā)生組織自溶，導(dǎo)致包涵體無(wú)法檢出。此外送檢的雞應(yīng)該處于病程初期和中期。到了病程后期，由于上皮細(xì)胞被大量破壞，可能會(huì)看不到合胞體和包涵體。包涵體檢測(cè)具有高度特異性，但是對(duì)樣品的要求較高，且敏感度相對(duì)低。
圖3：顯微鏡下的合胞體和核內(nèi)包涵體（來(lái)源：Vasudevan Gowthaman）
病原學(xué)方法包括PCR、病毒分離、免疫熒光和免疫組化等。
PCR的原理是檢測(cè)傳喉病毒的基因，具有成本低、耗時(shí)短、敏感度高等優(yōu)勢(shì)，而且對(duì)樣品的要求也相對(duì)低，是目前診斷禽病常用的一種方法。將PCR與基因測(cè)序相結(jié)合還可以區(qū)分野毒和疫苗毒。
常用的病毒分離方法是將病料接種于雞胚的絨毛尿囊膜。傳喉病毒會(huì)在此處形成不透明的斑塊（圖4）。病毒分離相對(duì)于PCR成本更高，耗時(shí)更長(zhǎng)，對(duì)采樣和送樣的要求也更高。但是通過(guò)病毒分離可以獲得活病毒，以便于做進(jìn)一步的毒力和組織嗜性等方面的研究。PCR和病毒分離都存在一個(gè)相同的缺陷，即只能證明傳喉病毒在病雞體內(nèi)存在，但是不能直接證明是傳喉病毒導(dǎo)致了雞發(fā)病。
圖4：雞胚絨毛尿囊膜上的斑塊（來(lái)源：LDA 22）
免疫熒光和免疫組化是通過(guò)熒光顯色或化學(xué)染色的方法展示出病變部位的傳喉病毒。由于成本高，操作復(fù)雜，耗時(shí)長(zhǎng)而應(yīng)用較少。
血清學(xué)方法是指檢測(cè)傳喉抗體。對(duì)于3周齡以上，沒有免疫過(guò)傳染性喉氣管炎常規(guī)活疫苗的雞群，傳喉抗體為陽(yáng)性即表示發(fā)生過(guò)ILTV感染。檢測(cè)抗體可采用瓊脂擴(kuò)散，免疫熒光或酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）等方法。由于ELISA成本低，敏感且標(biāo)準(zhǔn)化程度高，目前應(yīng)用最為廣泛。需要注意的是，傳喉血清抗體一般在感染后7天才開始轉(zhuǎn)陽(yáng)，感染后14天才能達(dá)到高峰。此外，抗體為陽(yáng)性僅表示雞感染過(guò)ILTV，不表示一定是ILTV引起了發(fā)病。早期感染過(guò)從其它雞群傳播過(guò)來(lái)的疫苗毒的雞群仍然會(huì)表現(xiàn)為ILT抗體陽(yáng)性。
當(dāng)PCR和ELISA結(jié)果為陽(yáng)性時(shí)，雖然無(wú)法完全肯定本次發(fā)病是傳喉病毒導(dǎo)致的，但是可以確定有傳喉病毒在雞場(chǎng)中流行。我們?nèi)匀恍枰扇∠鄳?yīng)的預(yù)防措施，避免發(fā)生損失。
